Kako se proteini sisavaca izoliraju i pročišćavaju u laboratoriju?

Pozdrav, kolege znanstveni entuzijasti! Kao dobavljač proteina sisavaca, jako sam oduševljen što mogu podijeliti detalje o tome kako izoliramo i pročišćavamo ove nevjerojatne molekule upravo ovdje u laboratoriju. To je divlja vožnja, puna kul tehnika i zapanjujuće znanosti. Dakle, zaronimo!

Razumijevanje proteina sisavaca

Kao prvo, proteini sisavaca su prilično posebni. Oni igraju ključnu ulogu u svim vrstama bioloških procesa u našem tijelu, od kontrakcije mišića do imunološkog odgovora. Ti se proteini mogu pronaći u različitim izvorima sisavaca poput mlijeka, krvi i tkiva. A kao dobavljač, stalno smo u potrazi za najboljim načinima da dođemo do čistih, visokokvalitetnih proteina sisavaca koje možemo ponuditi našim kupcima.

Izvori proteina sisavaca

Izvori koje koristimo su raznoliki. Na primjer, mlijeko je zlatni rudnik. Kravlje mlijeko je poznato po svom sadržaju proteina, ali devino mlijeko također postaje sve popularnije. Provjerite našeKinesko devino mlijeko u prahu, sušeno punomasno mlijeko bez ikakvih aromaiPunomasno punomasno mlijeko u prahu, instant topljivo za slastice i mliječne proizvode. Ovo su veliki izvori proteina sisavaca. Također se bavimoKina Veleprodaja devinog mlijeka u prahu Sirovo devino mlijeko - u prahu, što je sirovina bogata jedinstvenim proteinima.

Izolacija proteina sisavaca

Priprema uzorka

Proces izolacije počinje pripremom uzorka. Kada dobijemo uzorak, recimo mlijeka, prvo se moramo uvjeriti da je u ispravnom stanju. Filtrirat ćemo ga kako bismo se riješili velikih čestica poput masnih kuglica ili krhotina. Ovaj korak je ključan jer ako ne očistimo uzorak, to može zabrljati kasnije korake pročišćavanja.

Liza stanica (ako je iz stanica ili tkiva)

Ako su naš izvor stanice ili tkiva, moramo ih razbiti kako bismo oslobodili proteine. To se zove liza stanice. Postoji nekoliko načina za to. Jedna uobičajena metoda je korištenje deterdženata. Deterdženti mogu razgraditi stanične membrane, dopuštajući proteinima da se izliju u otopinu. Drugi način je mehanička liza, poput korištenja homogenizatora. To je kao da se stanice jako protresu da bi se otvorile.

Centrifugiranje

Nakon lize koristimo centrifugiranje. Ovo je poput super-brzog ciklusa centrifuge. Stavili smo naš uzorak u centrifugu, a ona se vrti jako velikom brzinom. Teži dijelovi uzorka, poput staničnih krhotina i organela, tonu na dno, tvoreći kuglicu. Proteini ostaju u tekućem dijelu, koji se naziva supernatant. Pažljivo prikupljamo supernatant jer se tamo nalaze naši dragocjeni proteini.

Pročišćavanje proteina sisavaca

Kromatografija

Kromatografija je jedna od najvažnijih tehnika pročišćavanja koju koristimo. Postoje različite vrste, ali počnimo s kromatografijom ionske izmjene. Proteini imaju različite naboje ovisno o svom aminokiselinskom sastavu. U kromatografiji ionske izmjene koristimo kolonu ispunjenu smolom koja ima specifičan naboj. Ako naši proteini imaju naboj suprotan naboju smole, zalijepit će se za nju. Zatim možemo promijeniti uvjete, poput koncentracije soli, kako bi se proteini odlijepili i izašli iz kolone jedan po jedan.

Druga vrsta je kromatografija po veličini. Kao što naziv sugerira, ova metoda razdvaja proteine ​​na temelju njihove veličine. Stup je ispunjen sitnim kuglicama koje imaju pore različite veličine. Manji proteini mogu ostati zarobljeni unutar pora, dok veći proteini samo brže teku kroz stupac. Na taj način možemo odvojiti proteine ​​prema njihovoj molekularnoj težini.

Afinitetna kromatografija

Afinitetna kromatografija je super cool. Iskorištava prednosti specifičnih interakcija između proteina i drugih molekula. Na primjer, ako naš protein ima specifičnog partnera za vezanje, možemo tog partnera pričvrstiti na smolu u stupcu. Kada naš uzorak prođe kroz kolonu, ciljni protein će se vezati za svog partnera na smoli, dok će drugi proteini proći kroz njega. Zatim, možemo koristiti posebnu otopinu da prekinemo vezanje i dobijemo naš pročišćeni protein.

Ultrafiltracija

Ultrafiltracija je još jedan zgodan alat. Pomalo je kao super - fino sito. Koristimo membranu s određenim veličinama pora. Male molekule i voda mogu proći kroz membranu, ali naši proteini, koji su veći, ostaju iza nje. To nam pomaže da koncentriramo našu otopinu proteina i također se riješimo sitnih nečistoća.

Kontrola kvalitete

Nakon što smo izolirali i pročistili naše proteine ​​sisavaca, ne šaljemo ih odmah. Imamo strogi proces kontrole kvalitete. Koristimo tehnike poput SDS - PAGE (natrijev dodecil sulfat - elektroforeza u poliakrilamidnom gelu) za provjeru čistoće naših proteina. To je kao utrka za proteinima. Stavljamo naše uzorke proteina u gel, a zatim primjenjujemo električnu struju. Proteini će se kretati kroz gel ovisno o njihovoj veličini. Ako vidimo jednu traku, to znači da je naš protein prilično čist.

Također koristimo masenu spektrometriju za točno određivanje molekularne težine naših proteina. To nam pomaže da budemo sigurni da imamo pravi protein i da on nije razgrađen ili modificiran tijekom procesa izolacije i pročišćavanja.

Zašto su naši izolirani i pročišćeni proteini sisavaca važni

Proteini koje isporučujemo koriste se u širokom rasponu primjena. U farmaceutskoj industriji mogu se koristiti za razvoj novih lijekova. Na primjer, neki proteini mogu djelovati kao antitijela u borbi protiv bolesti. U prehrambenoj industriji, proteini sisavaca koriste se za poboljšanje nutritivne vrijednosti i teksture prehrambenih proizvoda.

A budući da koristimo tako rigorozne tehnike izolacije i pročišćavanja, naši kupci mogu biti sigurni da dobivaju visokokvalitetne, čiste proteine ​​sisavaca. Bilo da ste istraživač u laboratoriju ili proizvođač hrane u potrazi za najboljim sastojcima, naši su proizvodi izvrstan izbor.

Povežimo se za nabavu

Ako ste zainteresirani za naše proteine ​​sisavaca i želite započeti raspravu o nabavi, ne ustručavajte se kontaktirati! Uvijek smo željni surađivati ​​s novim kupcima i pomoći vam pronaći savršene proteinske proizvode za vaše potrebe. Bilo da se radi o istraživanju, proizvodnji hrane ili bilo kojoj drugoj primjeni, mi vas pokrivamo.

Reference

• Lodish, H., Berk, A., Kaiser, CA, Krieger, M., Scott, MP, Bretscher, A.,... i Matsudaira, P. (2008). Molekularna stanična biologija. WH Freeman.
• Deutscher, MP (Ur.). (1990). Vodič za pročišćavanje proteina. Akademski tisak.